国产真实乱人偷精品人妻,亚洲精品日韩一区二区日本,亚洲不卡高清一区二区三区,99久久一区二区三区免费

技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > NK細胞的殺傷活性檢測
NK細胞的殺傷活性檢測
更新時間:2016-01-04   點擊次數:2352次

(一)原理

   以NK細胞為例。將待測者外周血中的NK細胞與靶細胞(K562細胞)按一定比例混合培養一定時間,NK細胞作用于靶細胞,使靶細胞被殺死、破壞,進而使靶細胞線粒體內的乳酸脫氫酶釋放出來.使底物發生顏色變化,其顏色深淺與酶的釋放量成正比,檢測顯色后的光密度OD值,便可推算出NK細胞的殺傷活性。

(二)材料

1.待檢者肝素抗凝血,靶細胞為K562細胞。

2.RPMI 1640培養液、淋巴細胞分離液。

3.酶標儀、離心機。

(三)方法

1.用含5%小牛血清的RPMI 1640培養液將靶細胞調整到5×104~2×105/ml,此濃度需根據情況預先標定。

2.取待檢者肝素抗凝血3~5ml,經淋巴細胞分離液分離單個核細胞,為效應細胞。

3.在96孔圓底細胞培養板中加入靶細胞,每孔加100μl。3個效應細胞自然釋放對照孔不加靶細胞.只加100μl培養液。

4.向各孔加:100μl效應細胞,效應細胞與靶細胞的比例根據要求而定,通常為5:l~20:1。自然釋放孔不加效應細胞只加100μl培養液,zui大釋放孔中加100μl1%NP40。每個實驗設3個復孔。

5.置37℃5%CO2的培養箱中培養4~6h。

6.離心培養板1000r/min離心10min。每孔吸出150μl上清液.對應加入另一塊96孔酶聯檢測板中。向第二塊板每孔依次加20μl O.4mol/L乳酸溶液、20ml 4mmol/L 2一p一碘苯酯一3一p一氯化硝基苯四唑,20μl反應液[含O.03%BSA.2.7U/m1硫辛酰胺脫氫酶.4.5mmol/L氫化型輔酶I(NAD+ ),1.2%蔗糖的PBS],室溫中放置20min。

7.在酶聯檢測儀上測定各孔的光密度(OD值),檢測波長492nm,參考波長650nm;

 

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
亚洲av日韩av一区久久| 久久久久无码国产精品一区| 亚洲成av人片乱码在线| 色哟哟国产精品一区二区| 97精品久久天干天天蜜| а√最新版地址在线天堂| 亚洲午夜久?久影院伊人| 91久久久久久| 久久精品aⅴ无码中文字字幕蜜桃| k8经典电影片在线观看| 久久久99婷婷综合精品| avtt天堂网久久精品| 无码一区二区三区在线| 青娱乐免费视频在线播放| 国产级级在线电影性欧美| 无码成人精品区在线观看| 午夜国产精品综合视频网站 | 久久国产精品成人18p| 97超碰免费在线观看视频 | 国产精品一区二区尿失禁| 亚洲av无码一区二区三区性色| 91精品第一国产综合精品| 国产精品久久久久久有女| 97无码欧美熟妇人妻蜜桃天美| 男人的天堂亚洲版18岁| 国产精品亚洲精品一区二区| 新人妻一区二区在线视频| 日韩欧美亚洲香蕉七次郎| 嗯嗯嗯!用力插在线视频| 国产精品毛片一区二区排| 午夜福利视频| 97精品人妻一区二区三区香蕉 | 久热久线在视频精品23| 国产91精品免费久久看| 国产亚洲一区二区三区av| 亚洲中文字幕无码中文字| 亚洲91精品国产摄像头| 亚洲欧美日韩精品综合一区| 日本麻豆一区二区三区视频| 日本中文一二区有码在线| lisaann在线观看|